ELISA試劑盒的溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫4℃等。37℃是試驗室中常用的保溫溫度，也是大多數抗原抗體結合的適宜溫度。在樹立ELISA方法作反響動力學研究時，試驗標明，兩次抗原抗體反響一般在37℃經1～2小時，產品的生成可達高峰。為加快反響，可進步反響的溫度，有些試驗在43℃進行，但不宜選用更高的溫度。但因所需時刻太長，在ELISA試劑盒中一般不予選用。

ELISA試劑盒實踐進程操作技巧：

1）加樣器應筆直參加標本，防止刮擦包被板底部，加樣進程中防止液體外濺，血清殘留在反響孔壁上。

2）加樣器吸頭要清洗干凈，防止污染，加樣次第要與說明書共同，否則可導致成果過錯，試驗重復性差。

3）在進行試驗前應對試驗的物理參數有充沛的了解，如環境溫度、反響孵育溫度和孵育時刻、洗刷的次數等，要先檢查水育箱溫度，ELISA試劑盒是否符合要求。

4）顯色液量不行過多，加樣的工作環境不能處于陽光直射的環境下，加顯色體系后要避光反響，顯色液量不能過多，防止顯色過強。

5）要確保加液量共同，在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量禁絕，造成顯色不一致，判別過錯。

ELISA試劑盒試驗水浴保溫辦法： 

1、可將ELISA試板置于水浴箱中，ELISA板底應貼著水面，使溫度敏捷平衡。

2、為防止蒸騰，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，可讓反響板漂浮在水面上。

3、濕盒應先放在保溫箱中預溫至規則的溫度，特別是在氣溫較低的時分更應如此。

4、操作時的室溫應嚴厲約束在規則的范圍內，規范室溫溫度是指20～25℃，但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。

5、若用保溫箱，應放在濕盒內，濕盒要選用傳熱性杰出的資料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，zui終將ELISA板放在濕紗布上。

6、室溫溫育時，只要平置于操作臺上即可。

7、無論是水浴還是濕盒溫育，反響板均不宜疊放，以確保各板的溫度都能敏捷平衡。

8、應注意溫育的溫度和時刻應按規則力求。

9、為確保這一點，一個人操作時，一次不宜多于兩塊板一起測定。